吳定妃(16世纪?—1555年),名失考。中國古代明朝皇族女性,明世宗朱厚熜之妃。
吳氏入宫时间、年龄均无考。吳氏生前未封妃,嘉靖三十四年(1555年)閏十一月二十九日,未封妃吳氏薨,賜號为定,喪儀如平妃耿氏[1]。嘉靖三十五年(1556年)二月二十五日,授定妃吳氏父吳登為錦衣衛副千戶[2]。