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293T

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293T(或HEK293T)是一種由HEK 293細胞系衍生的人類細胞系,表達SV40大T抗原突變體。常用於生物蛋白的表達,以及重組逆轉錄病毒的製造。

來源

293T細胞系最初在史丹福大學Michele Calos的實驗室中製造,是一種穩定轉染了編碼SV40大T抗原溫度敏感型突變體質體的HEK 293細胞,最初被稱為293/tsA1609neo。[1] 其在文獻中第一次被稱為「293T」,是在被用於開發生產逆轉錄病毒顆粒的BOSC23細胞系時。[2]

特點

在製造293T細胞時轉染的pRSV-1609質體使得它具有新黴素/G418抗性,並且可以表達SV40大T抗原的tsA1609突變體。這種突變的基因在33℃時具有完全的活性,在37℃時也具有相當的活性,但是在40℃時失活[3]。和它的原型293細胞一樣,293T細胞在用DNA轉染時效率很高。而且由於SV40大T抗原的表達,攜帶SV40複製原點的質體可以在293T細胞中複製,並且在短時間內保持較高的拷貝數,使得其表達重組蛋白或病毒的量大大增加。

基因組

對3個獨立的293T分離株細胞系都已經進行了全基因組測序,它們彼此之間是相似的,不過和原來HEK 293細胞系的基因組都已經有可檢測的差別[4]

參考文獻

  1. ^ DuBridge RB, Tang P, Hsia HC, Leong PM, Miller JH, Calos MP. Analysis of mutation in human cells by using an Epstein-Barr virus shuttle system. Mol. Cell. Biol. Jan 1987, 7 (1): 379–387. PMC 365079可免費查閱. PMID 3031469. doi:10.1128/MCB.7.1.379. 
  2. ^ Pear WS, Nolan GP, Scott ML, Baltimore D. Production of high-titer helper-free retroviruses by transient transfection. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 15 Sep 1993, 90 (18): 8392–8396. PMC 47362可免費查閱. PMID 7690960. doi:10.1073/pnas.90.18.8392. 
  3. ^ Rio, D. C.; Clark, S. G.; Tjian, R. A mammalian host-vector system that regulates expression and amplification of transfected genes by temperature induction. Science (New York, N.Y.). 1985-01-04, 227 (4682): 23–28. ISSN 0036-8075. PMID 2981116. doi:10.1126/science.2981116. 
  4. ^ Lin, Yao-Cheng; Boone, Morgane; Meuris, Leander; Lemmens, Irma; Van Roy, Nadine; Soete, Arne; Reumers, Joke; Moisse, Matthieu; Plaisance, Stéphane. Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations. Nature Communications. 2014-09-03, 5: 4767 [2020-01-03]. ISSN 2041-1723. PMC 4166678可免費查閱. PMID 25182477. doi:10.1038/ncomms5767. (原始內容存檔於2019-09-13). 

外部聯結