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光漂白

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光漂白:這個影像展示了一個螢光團的光漂白現象。此影像經過加速,整個過程真正發生時間為4分鐘。

光漂白(英語:Photobleaching,亦称为光致褪色)是一個對螢光團的光化學破壞。在显微术中,光漂白使得觀測變得很複雜,因為它會造成破壞,使螢光團無法繼續放光。此現象造成間歇性拍攝光譜(time-lapse microscopy)觀測上的干擾。

然而,光漂白也提供了些應用在quench自发荧光上(主要在antibody-linked)。這可以幫助提高信噪比signal-to-noise ratio

光漂白也用來研究分子運動和分子擴散現象,像是FRAPFLIP技術。

我們可以藉著控制光的強度以及照射時間,來進而控制光漂白的現象。或是使用結構較強的螢光團來減少光漂白的現象(例: Alexa Fluors 或 DyLight Fluors)。一個適當讓螢光分子被破壞的方法是固定條件(強度x照射時間x循環次數),因為在固定這些條件下,每次吸收放光循環有相同的光漂白期望值。

生命期

生命期取決於物質的不同。 不同染劑在不同數量的光子照射下會有不同的生命期(例:在105 photons/s):

請小心這裡說的"生命期"與一般在序書螢光基團的"生命期"並不相同,一般螢光基團的生命期可以參考荧光寿命成像

外部連結

  • Introduction to Optical Microscopy[永久失效連結] an article about 光漂白
  • Viegas MS, Martins TC, Seco F, do Carmo A. An improved and cost-effective methodology for the reduction of autofluorescence in direct immunofluorescence studies on formalin-fixed paraffin-embedded tissues. Eur J Histochem. 2007, 51 (1): 59–66. PMID 17548270.