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TBE緩衝液

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TBETris/Borate/EDTA,是一種緩衝液,含有三羥甲基氨基甲烷(Tris)、硼酸,和EDTA

在分子生物學上,TBE和TAE英语TAE buffer經常用於溶解核酸,最常見於電泳實驗。由於Tris類的緩衝液皆呈弱鹼性,因此可將DNA脫除氫離子而有帶電性,更容易溶於水中。EDTA則是一種雙價陽離子螯合劑,特別是對離子(Mg2+)。由於核酸酶需要這些離子,EDTA可以將這些離子牢牢抓住,避免核酸降解。但要注意的是,鎂離子同時是很多酵素的輔助因子,如限制酶DNA聚合酶等等,因此EDTA的濃度一般不會太高(通常在1mM左右)。

近期研究顯示,TBE和TAE在電泳中是可以互相置換的[1]

配方(1公升,5倍濃度貯存液)

  • 54 g 的Tris (CAS# 77-86-1)
  • 27.5 g 的硼酸(CAS# 10043-35-3)
  • 20 ml 的 0.5 M EDTA (CAS# 60-00-4) (pH 8.0)

鹽酸pH值調整至8.3[2]

TBE貯存液在進行電泳之前需將濃度稀釋為適當濃度。

參見

參考文獻

  1. ^ Brody, J.R.; Kern, S.E. History and principles of conductive media for standard DNA electrophoresis (PDF). Anal Biochem. 2004, 333 (1): 1–13 [2015-09-05]. doi:10.1016/j.ab.2004.05.054. (原始内容 (PDF)存档于2012-12-24). 
  2. ^ 存档副本 (PDF). [2015-09-05]. (原始内容存档 (PDF)于2016-03-04).